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      孔雀石綠ELISA檢測試劑盒

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      一、產品簡介

      本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預包被偶聯抗原,樣本中的殘留物孔雀石綠將和微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗孔雀石綠抗體,加入酶結合物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物孔雀石綠的含量成負相關,與標準曲線比較即可得出相應殘留物孔雀石綠的含量。

      二、適用范圍

      可定性定量檢測水產(魚、蝦)等樣品中孔雀石綠的殘留量。

      三、產品參數

      詳見說明書。

      四、儲存及有效期

      儲存條件:試劑盒保存于2-8℃,切勿冷凍;

      保 質 期:該產品有效期為1年,生產日期見外包裝盒

      五、檢測步驟

      使用前將試劑和微孔板回溫至室溫,用后放回2-8℃。

      1、準備:取出需要數量的微孔板,其余的放入自封袋中,保存于2-8℃。建議每個樣和標準液做2個平行試驗。

      2、加樣:加入標準品/樣品50μL/孔到相應的微孔中,然后加入酶結合物50μL/孔,最后加入抗體工作液50μL/孔,輕輕震蕩混勻后,蓋上蓋板膜。

      3、孵育:室溫25℃避光反應30分鐘。

      4、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,加入洗滌液250μL/孔到微孔中,重復洗滌5次,每次間隔10秒,用吸水紙拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

      5、顯色:依次加入底物液A 50μL/孔,底物液B 50μL/孔,輕輕震蕩混勻后,蓋上蓋板膜,室溫25℃避光反應15分鐘。(亦可A、B液等體積混勻,加100μL/孔,按需即配即用。)

      6、終止和讀值:加入終止液50μL/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630 nm檢測,請在5分鐘內讀完數據),測定每孔OD值。(若無酶標儀,則不加終止液用目測法可進行判定)。

      六、結果分析/判讀

      百分吸光率為標準品或樣品的平均OD值除以零標準的平均OD值,再乘以100%,零標準為100%(最大吸光度值),其他OD值為最大吸光度的百分數。

      B:標準溶液或樣本溶液的平均吸光度

      B00ppb標準溶液的平均吸光度值

      校準曲線

      以log(標準品濃度)為橫坐標,以Logit(B/B0)為縱坐標,構建線性回歸方程。將樣品的Logit(B/B0)值代入上述回歸方程,求得的值乘以樣本稀釋倍數,即為樣本中孔雀石綠的含量。